Metodi della cura dell’infertilità

Se i valori dello spermiogramma sono nella norma e la donna ha un’ovulazione regolare è possibile suggerire alla coppia di ricorrere al trattamento di inseminazione intrauterina.

Gli spermatozoi del partner sono elaborati in maniera particolare e tramite il catetere sono direttamente trasferiti nella cavità uterina della donna. Se per qualsiasi motivo non è possibile utilizzare lo sperma del partner, c’è la possibilità di ricorrere al trattamento di inseminazione intrauterina con gli spermatozoi donati – AIUI.

La IVF/FIVET è il principale metodo di riproduzione assistita durante il quale gli ovociti sono fecondati dagli spermatozoi all’esterno del corpo della donna.

Gli ovociti della donna che si è sottoposta alla stimolazione ormonale sono prelevati e messi in contatto con gli spermatozoi del partner elaborati in maniera particolare. La fusione dei gameti femminili e maschili avviene in una speciale provetta di coltura contenente un terreno di coltura, depositata in condizioni adeguate in un contenitore di coltura.

Si ricorre al trattamento nel caso che lo spermiogramma del partner non corrisponda ai parametri dello spermiogramma normale di un uomo sano fertile. Uno dei criteri più importanti è la morfologia degli spermatozoi. Se il risultato dello spermiogramma non è ottimale viene sempre suggerito il metodo ICSI per impedire allo spermatozoo sbagliato di entrare nell’ovocita e quindi minimizzare la possibilità di ottenere un embrione difettoso.

Indicazioni per la IVF / FIVET

• normospermia
• numero sufficiente di ovociti da fertilizzare (6 e più)
• età massima della donna di 35 anni

MACS - Tecnica di nuova generazione per selezionare spermatozoi.

MACS -  una nuova generazione del sistema di selezione immunomagnetica delle cellule, cioè un efficiente metodo per selezionare i migliori spermatozoi ed aumentare il tasso di gravidanza. L’integrità genetica dello spermatozoo è essenziale per il normale sviluppo embrionale. Un alto livello di frammentazione del DNA nelle cellule spermatiche può influenzare negativamente le suddivisioni embrionarie fino a produrre un arresto allo stadio di blastocisti o aborti precoci.. Il danno del DNA, che si esprime con la sua frammentazione e la successiva apoptosi degli spermatozoi, può essere una causa di infertilità maschile che non viene evidenziata dalle comuni analisi eseguite sul liquido seminale (valutazione della concentrazione, della morfologia e della motilità degli spermatozoi).

Le maggiori cause del danno del DNA spermatico sono lo stress ossidativo, che generalmente aumenta con l’età, infezione , processi infiammatori, fumo di sigarette, uso di stupefacenti, esposizione ad agenti inquinanti ambientali ed un’elevata temperature dei testicoli.

Perciò il sistema MACS annessina è stato progettato per rimuovere selettivamente, dalle preparazioni di sperma, quegli spermatozoi deficitari, seppur indistinguibili morfologicamente dai normali.. Questa tecnica inizia con l’etichettatura magnetica delle cellule che sono da eliminare, indi il preparato viene fatto passare attraverso una colonna di separazione dove gli spermatozoi anomali vengono trattenuti. Invece gli spermatozoi intatti, viventi, senza frammentazione del DNA passano attraverso la colonna e sono poi raccolti per un successivo uso (ICSI o crioconserva­zione).

Il disporre di sperma pronto per la fertilizzazione è il vantaggio di questa metodica sugli altri tradizionali test di frammentazione del DNA test che forniscono solo la percentuale di cellule danneggiate, informazione poco utile nella pratica clinica. Analogamente I metodi che si basano sulla valutazione morfologica degli spermatozoi, come l’IMSI, non forniscono un sufficiente quadro sullo stato del DNA spermatico.

Il trattamento ICSI è un metodo di micromanipolazione che consiste nella selezione dello spermatozoo idoneo (spermatozoo di qualità con buona motilità e morfologia). Lo spermatozoo viene ingrandito sotto il microscopio e tramite una micropipetta di vetro viene immobilizzato, prelevato e iniettato nel citoplasma di un ovocita maturo.

Lo spermatozoo viene ingrandito sotto il microscopio e tramite una micropipetta di vetro viene immobilizzato, prelevato e iniettato nel citoplasma di un ovocita maturo.

L’utilizzo del metodo ICSI è in alcuni casi inevitabile. Soprattutto in caso di una bassa concentrazione degli spermatozoi oppure in caso di una insufficiente morfologia e motilità degli spermatozoi del partner.

Indicazioni per la ICSI

• nello spermiogramma del partner non risulta una normospermia
• numero basso degli ovociti prelevati nella donna (5 e meno)
• nessuna fertilizzazione durante il tentativo precedente
• sviluppo sfavorevole degli embrioni nei tentativi precedenti
• ripetuti aborti durante i tentativi precedenti
• età della donna sopra i 35 anni

La tecnica PICSI è un metodo di micromanipolazione più efficace per la selezione dello spermatozoo adatto alla ICSI. La selezione degli spermatozoi viene eseguita mediante l’acido ialuronico, proteina che è presente nella zona pellucida che circonda l’ovocita.

Al laboratorio viene “offerto” agli spermatozoi, elaborati per la fertilizzazione dell’ovocita, l’acido ialuronico. Soltanto lo spermatozoo abile a fertilizzare l’ovocita viene, grazie a recettori specifici, attratto all’acido ialuronico. Gli spermatozoi non abili alla fertilizzazione non possiedono questi recettori specifici, non sono attratti all’acido ialuronico e quindi non saranno utilizzati perla ICSI. Negli spermatozoi che hanno questa abilità di adesione è stata dimostrata una presenza più bassa di anomalie cromosomiche e una migliore integrità del DNA.

Il vantaggio della tecnica è il fatto che lo spermatozoo può risultar avere morfologia e motilità normale però non essere abile a fertilizzare l’ovocita. 

Indicazioni per la PICSI

• scarsa fertilizzazione dopo la ICSI
• valori dello spermiogramma ai limiti bassi della norma
• sviluppo sfavorevole degli embrioni nei tentativi precedenti
• ripetuti aborti durante i tentativi precedenti
• età della donna sopra i 35 anni

Il monitoraggio continuo degli embrioni è un nuovo metodo di coltura degli embrioni in vitro. Il metodo consente di monitorare lo sviluppo degli embrioni senza la necessità di controllarlo sotto il microscopio fuori del contenitore di coltura.

Rende possibile un monitoraggio continuo dello sviluppo embrionale sullo schermo. La selezione del migliore embrione che è adatto al transfer è molto più efficace. È possibile osservare il percorso della divisione delle cellule ed escludere gli embrioni con sviluppo anormale e quindi aumentare le chances di ottenere una gravidanza di successo.

Il metodo recentemente introdotto nella riproduzione assistita porta a una selezione migliore degli embrioni adatti al trasferimento nell’utero e aumenta il tasso di successo della terapia.

È una soluzione adatta da suggerire alle coppie interessate all’ovodonazione, alle coppie con numero basso degli ovociti ottenuti dopo il pick-up e alle coppie i cui gameti non sono di buona qualità.

L’embriologo osserva lo sviluppo continuo degli embrioni sullo schermo e immediatamente può riconoscere l’embrione che nelle singole tappe della coltura si sviluppa in maniera anormale. 

Indicazioni per il monitoraggio degli embrioni

• valori dello spermiogramma ai limiti bassi della norma
• scarsa fertilizzazione dopo la ICSI
• sviluppo sfavorevole degli embrioni nei tentativi precedenti
• ripetuti aborti nell’anamnesi della coppia
• età avanzata della donna
• donna ricevente degli ovociti donati

Le tecniche  e TESE sono suggerite alla coppia nel caso che nell’eiaculato dell’uomo non ci siano spermatozoi, ci sia una bassa concentrazione degli spermatozoi, morfologicamente anormali, oppure ci siano spermatozoi non sviluppati.

TESE – Estrazione degli spermatozoi dai testicoli

Il tessuto prelevato dai testicoli viene elaborato e viene controllata la presenza degli spermatozoi sotto il microscopio. Gli spermatozoi ottenuti tramite la tecnica TESE devono essere elaborati tramite metodi speciali nel laboratorio andrologico e preparati per la tecnica ICSI (iniezione dello spermatozoo scelto nell’ovocita della donna). Se la concentrazione degli spermatozoi è sufficiente, è possibile congelare gli spermatozoi restanti per un eventuale successivo utilizzo. Il congelamento di spermatozoi così ottenuti rappresenta un vantaggio per l’uomo che non deve sottoporsi ripetutamente a questo intervento chirurgico.

Indicazioni per la TESE

• assenza di spermatozoi nell’eiaculato dell’uomo
• concentrazione estremamente bassa di spermatozoi nell’eiaculato, morfologia anormale degli spermatozoi, spermatozoi non completamente sviluppati
• vasectomia dell’uomo

La PGD rende possibile analizzare l’embrione durante la coltura ancora prima del suo trasferimento nell’utero della donna. Tramite la PGD si escludono gli embrioni affetti da anomalie genetiche.

Lo PGS è un esame genetico che aiuta a identificare anomalie cromosomiche di recente formazione prima che l’embrione venga impiantato nell’utero.

PGD – Diagnosi genetica preimpianto

Si può trattare di anomalie cromosomiche (traslocazione, aneuploidi, ecc.) oppure di difetti di un gene, quindi malattie monogenetiche. La PGD viene eseguita tramite il prelievo delle cellule (blastomeri) dagli embrioni e la loro sottoposizione all’analisi genetica. La PGD aiuta ad escludere il trasferimento di embrioni affetti da una grave patologia genetica.

PGS – Screening genetico preimpianto

Lo PGS è un esame genetico che aiuta a identificare anomalie cromosomiche di recente formazione prima che l’embrione venga impiantato nell’utero.

Indicazioni per la PGD / PGS

• sviluppo sfavorevole degli embrioni nei tentativi precedenti
• ripetuti valori dello spermiogramma ai limiti bassi della norma
• ripetuti aborti nell’anamnesi della coppia
• carico genetico nella famiglia
• età avanzata della donna, dell’uomo

L’hatching assistito è una tecnica di micromanipolazione che consiste nell’incidere l’involucro dell’embrione e influisce sul successo della cura di infertilità.

Per l’annidamento di un embrione nella mucosa uterina è necessario che esso fuoriesca dal suo involucro (zona pellucida) che lo protegge durante la coltura. In alcune donne non avviene l’impianto perché la zona pellucida dell’embrione è troppo spessa o forte. Con una micropipetta viene inciso l’involucro, il che facilita la fuoriuscita dell’embrione.

L’hatching assistito non può danneggiare l’embrione.

Il trasferimento degli embrioni nell’utero è per la paziente un intervento indolore, simile ad una normale visita ginecologica. Gli embrioni vengono introdotti nella cavità uterina con un sottile catetere.

Se il giorno del transfer ci sono più embrioni in cui si manifesta buona morfologia e buono sviluppo è possibile congelare questi embrioni in eccesso. Gli embrioni congelati possono essere conservati per decenni. È possibile utilizzarli e trasferirli dopo il precedente tentativo fallito oppure come secondo transfer del tentativo di successo.

Tra i vantaggi principali della crioconservazione degli embrioni è il fatto che la donna non è costretta a sottoporsi ad una iperstimolazione delle ovaie. Gli embrioni sono crioconservati tramite il metodo di vitrificazione. Il fondamento della vitrificazione consiste in un veloce e delicato congelamento.

Gli embrioni sono conservati in azoto liquido alla temperatura di -196°C, nella criobanca della Clinica.

È possibile congelare gli spermatozoi per i seguenti scopi: donazione; prima di sottoporsi ad una cura oncologica; per le coppie che sono in attesa degli ovociti donati.

Su desiderio del partner maschile è possibile analizzare il suo sperma e congelare gli spermatozoi per il futuro utilizzo.

Gli spermatozoi sono conservati in azoto liquido alla temperatura di -196°C.

Dopo una stimolazione ormonale è possibile congelare gli ovociti prelevati.

Il metodo è adatto soprattutto per le pazienti che devono sottoporsi ad una cura oncologica oppure per quelle che per qualsiasi motivo preferiscono congelare gli ovociti e utilizzarli nel futuro.

Gli ovociti sono conservati in azoto liquido alla temperatura di -196°C.

Crioembriotransfer – il trasferimento degli embrioni scongelati nell’utero è per la paziente un intervento indolore, simile ad una normale visita ginecologica.

Dopo lo scongelamento degli embrioni viene valutata la loro qualità e dopo una breve coltura gli embrioni vengono trasferiti nella cavità uterina con un sottile catetere.

L‘EmbryoGlue è un terreno di coltura con la combinazione unica dell’acido ialuronico e albumina ricombinante, che supporta l’impianto degli embrioni.

L’aggiunta di acido ialuronico in un’alta concentrazione in questo terreno di coltura aumenta il numero di bambini nati vivi dopo trattamenti della procreazione assistita. L‘EmbryoGlue contiene tutte le sostanze nutritive e le risorse energetiche necessarie per lo sviluppo ottimale dell’embrione dopo il suo trasferimento nell’utero. Un‘alta concentrazione dell’acido ialuronico che supporta l’impianto, la sintesi del quale è fisiologicamente aumentata il giorno dell’impianto crea le condizioni ideali per l’annidamento di successo dell’embrione.

ERA (Endometrial Receptivity Array) è un test diagnostico molecolare per studiare la ricettività dell'endometrio.

Ricettività dell'endometrio è una condizione in cui l'endometrio (mucosa uterina) è pronto per l'impianto (attecchimento) dell'embrione, la situazione ottimale sarebbe per ogni donna fertile tra 17 – 21 del ciclo mestruale. 

Questo test esamina 238 geni. Periodo più opportuno per eseguire il ciclo di prova che precede il ciclo in cui è previsto il trasferimento di embrioni.